小鹅瘟病毒
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第606页(931字)
又名雏鹅肝炎病毒。主要引起雏鹅急性肠炎及肝、肾等炎症,发病率和死亡率均很高。此外,还可感染番鸭。
一、样品采集
可取急性期雏鹅的肝、脾、肾等实质脏器或心血。
二、病毒分离
(一)细胞分养 本病毒对细胞培养的专嗜性很强,除鹅胚适应毒株可能在鹅胚细胞内增殖外,其他动物的细胞培养均不能适应。接种鹅胚成纤维细胞,可能出现轻微的CPE。
(二)鹅胚接种 初次分离时应用无母源抗体的鹅胚或番鸭胚。将病料悬液接种13~14日龄鹅胚的绒尿膜或尿囊腔内,5~7天后,约有半数鹅胚死亡。连续传代可缩短致死时间。鹅胚病变一致表现为绒尿膜增厚,并有灰白色针尖大坏死点,胚体及内脏均充血或出血。
(三)动物试验 无母源抗体的雏鹅经口服或注射本病毒均可引起发病。除原宿主外,只有番鸭有易感性。
三、血清学试验
(一)中和试验 由成年鹅制备的免疫血清与含毒尿囊液以4∶1比例混合,另以无菌生理盐水代替血清作对照,分别接种鹅胚尿囊腔。如试验组鹅胚全部存活而对照组基本全部死亡,且呈现上述典型病变,可判为阳性。
(二)反向间接血凝试验 本病毒无直接凝集动物红细胞的作用。可先由小鹅瘟高免血清提取免疫球蛋白IgG,吸附于甲醛和丙酮醛固定的鹅红细胞表面。然后用如此致敏的红细胞与病毒样品在微量滴定板上进行HA试验。如先将稀释的病毒样品与已知抗血清相混合,作用后再滴加致敏的鹅红细胞悬液,即进行HI试验。
(三)琼扩试验 用8%氯化钠(pH7.8)配制1%2号离子琼脂,制板打孔,孔径5mm,孔距3mm。置湿盒内室温下孵育24h,观察沉淀线。沉淀抗原可由感染病毒的鹅胚或番鸭胚尿囊液制得。尿囊液稀释后经氟利昂处理30min,低速离心取上清,再超离取沉淀物,悬浮后用0.1%N-月桂酰肌氨酸处理,即可用于琼扩试验。