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出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第730页（1902字）

一、牛暂时热病毒(Bovine ephemeral fever virus)

牛暂时热也称为牛流行热，于夏末秋初短期内广泛流行，蚊、库蠓及其他吸血昆虫可能起媒介作用。本病只发生于牛，特别是黄牛和奶牛。

(一)样品采集 病牛的急性期无菌采取全血。双份血清测定时，一份于发病初期采取，另一份经2～4周的恢复期采取。

(二)病毒分离

1．细胞培养 本病毒可在Vero、猴肾和BHK-21等细胞中生长，产生细胞病变。细胞培养物可用中和试验、补体结合试验进行抗原性测定或作电镜观察。

2．动物试验 将1∶10血液或白细胞悬液，脑内接种乳鼠或乳仓鼠，6～10天可发病致死。取死亡鼠脑以中和试验进行鉴定。

(三)血清学试验

1．中和试验(鉴定病毒)

(1)将待检细胞培养物或鼠脑乳剂上清，以PBS作成10^-2和10^-3两个滴度，分别加入等量标准免疫血清和阴性血清，充分混合后，置4℃感作4h。

(2)分别脑内接种2日龄乳鼠，每组6只。

(3)观察10天，如果免疫血清组乳鼠全部或大多存活，而阴性血清组全部或大多死亡，即可证明待鉴病毒就是牛暂时热病毒。

2．血清中和抗体滴度测定

(1)将被检血清和已知阴、阳性血清用细胞维持液进行2倍连续稀释。

(2)各稀释度血清与已知病毒(100TCID₅₀／0．1ml)等量混合，经37℃水浴1h。

(3)各混合液分别接种4管BHK-21细胞，逐日观察细胞病变，共5天。

(4)中和抗体滴度＞4时可判定为阳性。

3．补体结合试验 按半微量补体稀释法进行，检测血清抗体。抗原分为两组：V抗原为接种病毒的BHK-21细胞抗原；C抗原为不接种病毒的BHK-21细胞培养物。效价＞0．3时判为阳性，在0．1～0．2为疑似，＜0．1为阴性。

(四)间接免疫荧光试验(检查血清抗体) 按常规方法，将接毒与未接毒的BHK-21细胞制备盖玻片培养，滴加阳性和阴性对照血清及待检血清，再加抗牛IgG荧光抗体后镜检。

(宁希德、马思奇编)

二、感染鱼的弹状病毒

感染鱼的弹状病毒有四种，即传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus，IHNV)、病毒性出血性败血病病毒Viral hemorrhagic septicemia virus，VHSV、鲤鱼春季病毒血症(Spring viremia of carp，SVC)病毒和梭鱼苗弹状病毒(Pike fry rhabdovirus，PFRV)。

一般认为这四种病毒应归入水泡性病毒属。它们对鱼的传染力很强，发病后通常经过迅速，死亡率高。

(一)样品采集 在流行病学、临床症状和病理解剖及组织学检查(见动物试验)的基础上，采集肝、脾、肾、胰等病变脏器。

(二)病理学检查 各种鱼弹状病毒病引起的病理学变化见表48-1。

表48-1 各鱼弹状病毒病的病理学变化

(三)病毒分离

1．细胞培养 根据病毒种类应用不同细胞和培养温度见表48-2。

表48-2 各鱼弹状病毒的细胞培养特征

2．动物试验 将样品悬液接种于健鱼腹腔内，观察发病症状(表48-3)。

表48-3 各鱼弹状病毒病的病症