(1)花生仁、壳、植株和土壤中残留量检测方法

出处：按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农药残留量实用检测方法手册第3卷》第472页（4058字）

北京化工研究院环境保护研究所 阮虹 纪然 谢强 马恒麟

样本中的精噁唑禾草灵母体及其代谢物，用乙腈提取、酸性水溶液水解和二氯甲烷萃取，进行乙酰化反应，反应产物用正己烷萃取，硅胶柱层析净化，气相色谱(ECD)测定。

1．主要仪器设备

气相色谱仪 电子捕获检测器(ECD)

旋转蒸发器

调速多用振荡器

索氏提取器

回流装置

层析柱 6mmi．d．×370mm

2．主要试剂

乙腈(重蒸)、二氯甲烷(重蒸)、正己烷(重蒸)、乙酸乙酯、石油醚(60～90℃)、浓盐酸

丙酮 加少量高锰酸钾回流至紫色不褪，重蒸，收集55～57℃馏分

乙酰化试剂 乙酸酐／吡啶(5∶1，V／V)

淋洗剂 乙酸乙酯／正己烷(2∶98，V／V)

无水硫酸钠 300℃灼烧4h

层析用硅胶 60～100目，130℃下烘4h，加6%水减活

标准品：

(1)精噁唑禾草灵(对乙基苯氧丙酸酯)

(2)AEF 088406代谢物(苯氧丙酸)

(3)AEF 054014水解产物(苯并噁唑酮)

(4)AEF 083312乙酰化产物(乙酰基苯并噁唑酮)

3．检测步骤

3．1 提取、水解

3．1．1 花生仁、壳、植株

花生仁粉碎后取20g；花生壳粉碎后取10g；洗掉根部泥土的花生植株剪碎后取10g。将样本置于250mL具塞三角瓶中，分别以60mL、40mL乙腈振荡提取两次，每次30min。经中速定性滤纸过滤，合并滤液。

取提取液90mL于250mL圆底烧瓶中，加入10mL浓盐酸和50mL水，在水浴(84～90℃)上回流6h，冷却，从装置顶部用少量水冲洗回流管。

3．1．2 土壤

称取20g土壤样本用滤纸筒包好，放置在100mL索氏提取器的提取管中，在150mL的平底烧瓶中加入90mL乙腈和10mL浓盐酸，从冷凝管顶部加入50mL水，在90℃水浴上回流提取6h。冷却，从装置顶部用少量水冲洗回流管。

3．2 净化

3．2．1 液-液分配

3．2．1．1 花生仁、壳、植株

将水解后的溶液加水至250mL，搅匀后，分取出125mL置于500mL锥形分液漏斗中，加入250mL2%硫酸钠溶液。用50mL×2石油醚洗涤并弃去有机相，然后用50mL×2二氯甲烷萃取，每次1min。合并二氯甲烷相，经无水硫酸钠(用二氯甲烷预淋)过滤于150mL平底烧瓶中，将收集到的滤液用旋转蒸发器(＜40℃)慢蒸至干。

3．2．1．2 土壤

将水解后的溶液加水至250mL，搅匀后，取出100mL置于500mL锥形分液漏斗中，加入200mL2%硫酸钠溶液。以下同3．2．1．1。

3．2．2 乙酰化

用丙酮分多次溶解上述蒸残物，并转移至10mL具塞离心管中，用氮气吹干。加入1mL乙酰化试剂，盖紧磨口塞，在130℃下反应2h。常温下冷却后，加入5mL2%硫酸钠溶液振摇以破坏过量的乙酰化试剂，用2mL×2正己烷萃取，每次1min，吸取上层正己烷相于另一10mL具塞离心管中，用氮气吹至约2mL。

3．2．3 柱层析净化

在层析柱中，用正己烷湿法装柱，依次装入2cm无水硫酸钠、2g硅胶和2cm无水硫酸钠。用少量正己烷将3．2．2残余溶液转移至净化柱上，并用正己烷淋洗，弃去40mL淋出液。改用2%乙酸乙酯正己烷溶液淋洗，弃去前3mL，收集后30mL洗脱液。浓缩至干，用正己烷定容至适当体积，待测。

3．3 气相色谱法测定

检测器 ECD

色谱柱 HP-1，30m×0．25mm×0．25μm

检测温度 进样口240℃；检测器280℃；柱温120℃，1min，1℃／min，140℃，50℃／min，250℃，5min。

载气 高纯氮气，总压38psi，柱前压7．5psi，恒流模式

流速 柱流速1．16～1．18mL／min，分流流速50mL／min

进样量 1μL不分流进样，0．6min后打开分流阀

保留时间 15．5min(AEF083312)

4．结果计算

外标(峰高)-标准曲线法定量。

式中 C——样本中精噁唑禾草灵的残留浓度，mg／kg

C₀——AEF 083312标准溶液浓度，μg／mL

A₀——AEF083312标准溶液浓度的测定峰面积

A₁——待测样本的峰面积

V₁——待测样本测定时的定容体积，mL

V₁——样本提取液的总体积，mL(一般为100mL)

V₂——水解时分取提取液的体积，mL(一般为90mL)

V₃——水解后加水后的总体积，mL(一般为250mL)

V₄——用于液-液分配分取的水解水溶液体积，mL(一般为125mL)

W——样本的取样量，g

1．71——精噁唑禾草灵与AEF083312的分子量比。如系测定AEF088406代谢物的残留浓度，则其数值为1．577。

5．灵敏度、准确度和精确度

最小检出量 2．1×10^－11g(AEF083 312)。

最低检测浓度 花生仁和土壤0．005mg／kg；壳和植株为0．01mg／kg。

回收率 各类样本中添加精噁唑禾草灵母体0．025～1．0mg／kg时，平均回收率为83．5%～106．4%；各类样本中添加其代谢物0．025～1．0mg／kg时，平均回收率为83．9%～102．9%。见表3-17-1、3-17-2。

相对标准偏差 1．8%～14．9%，详见表3-17-1、3-17-2。

表3-17-1 花生和土壤中精噁唑禾草灵添加回收率及相对标准偏差实验结果

表3-17-2 花生和土壤中AEF088406添加回收率及相对标准偏差实验结果

6．花生仁、壳、植株和土壤中精噁唑禾草灵乙酰化产物(AEF083312)气相色谱测定谱图

见图3-17-1。

图3-17-1 花生仁、壳、植株和土壤中精噁唑禾草灵乙酰化产物(AEF083312)气相色谱测定谱图