葡萄球菌的检验

出处：按学科分类—农业科学 中国轻工业出版社《肉类工业手册》第790页（1433字）

葡萄球菌的分布非常广泛，尤其是患有化脓性创伤、疮、疖或呼吸道感染的人和动物，是造成食品被本菌污染的重要来源。乳房炎病牛乳汁中也可能含有大量葡萄球菌。

肉品被金黄色葡萄球菌污染后，金黄色葡萄球菌产生的肠毒素非常耐热，一般烹调方法不能将其完全破坏，食后能引起食物中毒。因此，检验肉品中金黄色葡萄球菌具有重要的卫生意义。

(一)器材

(1)显微镜，温箱：(36±1)℃，离心机。

(2)灭菌试管，载玻片，酒精灯。

(3)灭菌吸管：1mL，5mL，10mL。

(二)培养基和试剂

(1)7．5%氯化钠肉汤，血琼脂，肉浸液肉汤，Baird－Parker氏培养基。

(2)灭菌盐水。

(3)兔血浆。

(三)检验程序

葡萄球菌检验程序如图5－2－4所示。

图5－2－4 葡萄球菌检验程序

(四)操作方法

1．一般培养

将上述混悬液(25g检样加225mL灭菌生理盐水)或液体检样吸取5mL接种于7．5%氯化钠肉汤50mL，同时挑取混悬液接种血平板及Baird－Parker氏培养基，置(36±1)℃温箱培养24h，7．5%氯化钠肉汤经增菌后转种于上述平板。挑取金黄色葡萄球菌菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。

2．形态

本菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄状，无芽孢，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径为0．5～1μm。

3．培养特性

在肉汤中呈混浊生长，血平板上菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有溶血圈。在Baird－Parker氏培养基上菌落为圆形、光滑、凸起、湿润，直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明带。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明带。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的色较淡些，外观可能粗糙并干燥。

4．血浆凝固酶试验

吸取1∶4新鲜兔血浆0．5mL，放入小试管中，再加入培养24h的葡萄球菌肉汤培养物0．5mL振荡混匀，置于(36±1)℃温箱或水浴内培养，每0．5h观察一次，观察6h，如呈现凝块即为阳性。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌菌株及肉浸液肉汤作为对照。