药敏试验应注意的几个问题
书籍:兽医微生物实验诊断手册
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第130页(661字)
一、试验菌
应采用新分离菌株,一般使用经培养6h或18h的肉汤培养物,用肉汤液或生理盐水作1∶1000或1∶10稀释。具体的接种剂量及方法,应视实际情况而定。
二、培养基
应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时,厚度合适(约5~6mm),不可太薄,一般90mm直径的平皿,倾注培养基18~20ml为宜。当有些药物具有抗代谢作用时,培养基内不能含有该代谢物。如进行磺胺类药物的抑菌试验,培养基内不能有对氨基苯甲酸或叶酸。
三、抗菌药物
药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果。需要精确配制。
四、培养时间
一般的培养温度和时间为37℃8~18h。但是,有些抗菌药扩散慢如多粘菌素,可将已放好抗菌药的平板培养基,先置4℃冰箱内2~4h,使抗菌药预扩散,然后再放37℃温箱中培养,可以推迟细菌生长,而得到较大的抑菌圈。
五、对照试验
为准确判断试验结果,实验中必须同时进行各种对照试验。
试验菌对照:在无药情况下,应能在培养基内正常生长。
稀释液对照:配制抗菌药物所用的稀释溶液应无抗菌作用。
抗菌药对照:药物原液应具有明显的抑菌作用。
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