克勒伯氏菌属
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第260页(1652字)
这属细菌广泛寄生于健康动物的呼吸道和肠道,在自然界中分布亦广,为条件病原菌,能使人畜发生肺炎、子宫炎、乳房炎和化脓性炎症(如创伤感染),或致败血症,其代表种为肺炎克雷伯氏菌(Kl.pneumoniae)。
此属细菌除具肠杆菌科的特性外,菌体比较粗短,约0.5~0.8×1~2μm,两端圆突或略尖,成对或单独存在,无鞭毛不运动,有明显的荚膜,尿素酶、V.P.反应、柠檬酸盐利用试验多为阳性,硫化氢、鸟氨酸脱羧酶均为阴性。在培养基上形成较大菌落,圆形、整齐、凸起、粘稠而带灰白色。在肉汤中可长成粘性沉淀,在培养基上可存活数周至数月,经55℃30min可杀死,但其荚膜物质耐热。本属菌对头孢菌素、庆大霉素及多粘菌素均敏感。
目前认为克雷伯氏菌属有四个种。一为肺炎克雷伯氏菌,此菌有三个亚种:肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种(Kl.pneumoniae subsp.pneumoniae)、肺炎克雷伯氏菌臭鼻亚种(Kl.pneumoniae subsp.ozaenae)、肺炎克雷伯氏菌鼻硬结亚种(Kl.pneumoniae subsp.rhinoscleromatis);第二个种是产酸克雷伯氏菌(Kl.oxytoca);还有两个种存在于自然界,是土壤克雷伯氏菌(Kl.terrigena)和植物克雷伯氏菌(Kl.planticola)。
本属菌的多项生化反应见表11-6。
表11-6 常见沙门氏菌的抗原结构与生化特性表
上述各菌中,肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种能引起多种畜类的肺炎,也是人类肺炎的重要病原之一。
肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种的检验:将病料接种于鲜血平板、普通平板或鉴别培养基平板上,37℃24h此菌即生长良好,菌落较大,2~4mm,圆形、光滑、整齐,淡灰白,发酵乳糖,不溶血,粘稠,钓取时呈丝状,即其菌落大而粘。染色为革兰氏阴性较短粗的杆菌,有荚膜,不运动,可疑为此菌,按表11-2作生化反应鉴定。此菌尿素酶阳性而苯丙氨酸脱氨酶为阳性,这样的肠杆菌科的细菌很少,除此菌外,只可能还有枸橼酸杆菌、耶辛氏菌、肠杆菌;此菌V.P.是阳性,而枸橼酸杆菌、耶辛氏菌是阴性,埃希氏菌也是阴性;此菌不运动,有荚膜,足可与肠杆菌区分;加上此菌对表11-6中的炭水化物,几乎都在48h内产酸产气,实不难确定。
如将分离的此菌,取其18h肉汤培养物1ml,注射于体重12~15g小白鼠腹腔,两天后可出现明显的腹膜炎及败血症而死亡。解剖涂片检查,可见大量革兰氏阴性成对有荚膜的较粗短杆菌存在于腹水及各组织涂片中(瑞特氏或姬姆萨染色显示荚膜较好),更有助于肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种的诊断。如有此菌的阳性血清作英膜膨胀试验,即可确诊。
荚膜膨胀试验法为:取腹腔液1环,加未不稀释的阳性血清一环,再加印度墨汁或吕氏美兰(亦称吕氏亚甲兰)一环,将三环液体混匀,加盖玻片,用油镜观察;同时以阴性血清或生理盐水代阳性血清,同样操作,作比较。加有阳性血清的,英膜较大,为阳性。阳性血清向生药厂购,印度墨汁向试剂商店购或用中国墨汁经细滤纸过滤后代用。吕氏美蓝(Loeffler’s methyIene blue)需自配,其配方为美蓝(methylene blue,即亚甲蓝)0.3g、95%酒精30ml、蒸馏水100ml、10%的KOH0.1ml。其制法系先将美兰置乳钵中研磨,逐渐加入酒精,磨好后置于玻瓶中,然后将KOH液加到蒸馏水中,并用这种碱性水冲洗乳钵并盛于同一玻瓶中,紧塞,静置。用时取上液。此液可长期贮存应用,快用完的底液如有沉淀可经滤纸过滤后应用。