病毒类脂的测定
书籍:兽医微生物实验诊断手册
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第594页(851字)
病毒核衣壳或囊膜上的主要类脂除去后病毒即失去感染力。大多数有囊膜的病毒对乙醚等脂溶剂有敏感性,一般称为乙醚敏感试验。
一、乙醚敏感试验
1.病毒悬液4份加乙醚1份充分混合,将瓶塞紧,在4℃冰箱内过夜。
2.混合液用2500r/min离心20min。
3.用移液管插到乙醚下吸取病毒悬液,滴定病毒的感染力。
二、氯仿敏感试验
1.将氯仿(A.R.)加于病毒悬液中,使最终浓度达5%,充分振摇后在4℃放置10min。
2.悬液用2000r/min离心沉淀5min,使氯仿沉于管底。
3.吸取上层液,作连续10倍稀释。每一稀释度接种4管细胞培养,滴定TCID50。
未经氯仿处理的病毒悬液作同样处理。
4.氯仿处理的悬液的感染力如比对照悬液低2.0log以上即可认为是敏感。
三、脱氧胆酸钠敏感试验
1.用0.75%牛血清白蛋白溶液配制0.2%脱氧胆酸钠,在4℃贮存,用前加温到37℃。
2.病毒悬液用5000xg离心沉淀1h。
3.病毒澄清液与脱氧胆酸钠溶液等量混合,同时病毒澄清液与营养液等量混合作为对照。
4.混合后,用pH7PBS在4℃透析24h,其间换液3次,以除去对细胞有毒的脱氧胆酸钠。
5.滴定毒价,比较差异同氯仿。
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