标本采取及制片

出处：按学科分类—医药、卫生 科学普及出版社《麻风病实验室工作手册》第46页（2733字）

一、设备及器材

采菌刀 采菌刀多是用手术刀柄配上合适的手术刀片。刀片规格很多，可根据习惯选用。刀刃应锋利。一般以刀刃窄尖者较好(13、15、17、18、23、24、36、36d均可选用)，常用的刀刃型号不宜经常变化。

载玻片 宜用商品载玻片，长75毫米，宽26毫米，厚1～1．2毫米。勿使用自己裁制的玻片，每次用后应妥为清洗，确保不留标本残余。初诊病人应使用新载玻片。经160°～170℃干烤2小时的无划痕迹的洁净载玻片亦可使用。但有划痕的旧载玻片要及时淘汰。

棉球 制备消毒的干棉球及酒精棉球。

橡皮手套 根据个人手掌大小选用。用前要认真检查是否漏气，用后要妥为消毒处理。

胶布 可预先撕成胶布条备用。

酒清灯、金刚笔、腊笔、铅笔、火柴、登记簿等。

二、查菌部位的选择

取材部位的选择，无论是诊断、分型、估计疗效、评定治愈，还是监督复发，基本原则是必须能够真实反映病人机体的荷菌情况。部位选择不当会人为地造成阳性度降低，甚至出现假阴性。

常规查菌部位一般为4～6处，包括眶上、耳垂、下颏及活动性皮肤损害等。浸润性皮损应从皮损的中央和边缘取材，丘疹及结节可在损害上直接取材；有痊愈倾向的皮损应从边缘的内侧取材，可疑的复发病例，除查眶上、耳垂、下颏等常规部位外，应同时查新皮损及以前阳性最强的部位，有时可加查肘及膝等部位。

三、查菌的间隔时间

接受联合化疗的病人，不论是住院治疗还是院外治疗，均应按下列规定按时查菌：PB病人于疗前和疗后各查菌一次，监测期每年一次；MB病人疗前查一次，疗程中及监测期每年查菌一次。

四、采取标本及制片方法

(一)皮肤涂片

皮肤查菌时应在光线充足、室温适当的地方进行，以便于观察皮损和选定取材部位。病人和取材者均应取舒适位置。对病人态度要和蔼，并向病人做些解释，以免病人紧张、恐惧，要使病人主动配合。

查菌部位选定后，先用酒精棉球擦拭消毒，待自然晾干。用左手拇指和食指平压在皮肤上，先向外分压皮肤，然后用力捏起皮肤。稍待片刻，使皮肤变苍白色，以防取材时出血。或者用刀柄或刀背在捏起的皮肤上轻轻刮几次促进皮肤失血。右手持锐利的取菌刀，用刀尖在被捏起的皮肤上割一长约5毫米、深约2～3毫米(以达真皮层为宜)的切口。皮肤切口后，如有血液流出，应立即用消毒棉球或纱布拭去，然后用刀尖在切口内轻刮1～3次，刮取切口底部及两侧的组织及组织液，立即在已准备好有标号玻片上涂抹成直经5～7毫米的圆形涂膜。涂制涂膜时刀尖要由里向外循圆圈按一个方向涂膜。涂膜要厚度适中，均匀一致，不应留有较大组织残渣。取材后要迅速涂片，因刀尖上的组织液甚少，易干，夏季尤然。切口创面要立即用消毒干棉球压迫止血(或用胶布条固定棉球止血)。待切口止血后才能让病人离开。

取完一处标本后，取材刀片先用酒精棉球揩拭，再通过酒精灯火焰灯头数次以达消毒目的。但勿烧灼过度，否则刀刃变钝。如有条件，一位病人用一个刀片最好。

注意事项：

1．取材人员应着工作服，戴帽及口罩、还要戴橡皮手套(尤其对MB病人取材时更应如此)。取材完毕后要妥善认真处理取材用具及工作环境，用过的棉球要及时焚烧处理。

2．每次取材要遵守同一操作方法，同室人员要统一取材操作规程。

3．用于初诊病人的查菌刀片要认真消毒，最好使用新玻片。

4．一张玻片上可涂4～6个涂膜。第一个涂膜要从编号的一端开始。涂膜排列要有一定顺序，顺序要与检验单符合。

5．皮肤切口应深至2～3毫米，达真皮层，以便提高阳性度。初学人员往往忽视这个问题，要多加练习。

6．取材时要尽量不出血，更不要取血做涂片。平日要严格要求，多加训练。使涂膜含血率减少到最低限度。

7．涂膜如含血液，可待涂膜自然晾干后(固定之前)，于涂膜上滴加几滴1%盐酸(或5%冰醋酸，或蒸馏水)，稍待片刻，待发生溶血后，用清水轻轻冲冼，晾干。

8．治疗前的病人皮肤较易取材，涂片质量也较高；有效治疗后，皮损渐变平、萎缩、不易取材，组织量少。年轻病人易取材，组织量较多；老年病人不易取材，组织量较少。遇此病人，皮肤切口要深些，多刮几次。

9．涂片制好后，自然晾干，立即固定，并应尽早染色。如不能立即染色，要妥为保存，要注意防尘、防霉，尤其要防止日光及紫外线灯照射。

(二)鼻粘膜涂片

根据患者病情、型类及临床需要，必要时可做鼻粘膜查菌。具体方法是：先让病人擤去鼻涕。取材者左手拇指上推病人鼻尖，暴露鼻腔，右手执无菌生理盐水浸湿的消毒棉棒，伸入鼻腔，在鼻中隔软骨处粘膜上轻轻用力擦拭几次，取出，将标本涂在玻片上。涂片自然晾干，加温固定，待染。晚期或严重病例多用棉拭子法。如系早期或病情较轻的病人可用小刀刮取。多在鼻中隔前下部刮取微量粘膜组织及渗出的组织液涂片(刀刮法易引起病人恐惧及疼痛，近年多不应用)。

鼻腔粘膜涂片有时查到寄生性非致病性抗酸杆菌，故在采取标本前应注意鼻粘膜的清洁。另外，镜检时要注意ML与非致病性抗菌杆菌的鉴别。