氰化盐-碘量法测定还原糖

出处：按学科分类—农业科学 农业出版社《土壤农化分析手册》第615页（1730字）

(一)适用范围 本法适测糖浓度为10ml浸提液中含糖1－15mg，浓度适中，故可测含糖多的果、蔬类。操作较易为初学者掌握，本法的准确度良好。

(二)试剂配制

1．5%ZnSO₄：50gZnSO₄·7H₂O溶于1L水中。

2．0．3NBa(OH)₂：25．7gBa(OH)₂溶解于煮沸逐尽CO₂的1L冷蒸馏水中。

3．ZnSO₄－KI混合液：(甲)ZnSO4溶液，31．25gZnSO₄·7H₂O溶于水，稀释至500ml。(乙)KI溶液，临用时将12．5gKI溶于水，稀释至100ml，贮于暗处。临用前，将4体积的ZnSO₄溶液与1体积的KI溶液混合，当天使用。

4．9%醋酸：260ml35－37%HOAc稀释至1L。

5．0．05N K₃Fe(CN)₆(铁氰化钾)：准确称取16．47g分析纯K₃Fe(CN)₆和70g无水Na₂CO₃，溶于水后转移入1L容量瓶中，定容，保存于棕色瓶中。

6．0．05NNa₂S₂O₃：称取12．5g分析纯Na₂S₂O₃·5H₂O溶于刚煮沸的冷水中，加入约0．1gNa₂CO₃，稀释至1L，保存于棕色瓶中。1天后进行标定：准确称取约0．1g分析纯K₂Cr₂O₇于250ml三角瓶中，加水30ml溶解，加入1．5gKI和5ml6NHCl，在暗处放置5min后，再加水50ml，用Na₂S₂O₃溶液滴定。当溶液由棕红色变为浅黄绿色时，加入1ml淀粉指示剂，继续滴定至溶液由蓝色突变为亮绿色(Cr³⁺的颜色)为止。

(三)测定步骤称取风干、磨细、混匀的植物茎叶(过1mm筛)1g左右(或称取新鲜样品约5g，在研钵中加少许石英砂共同研磨)，用水小心地转入100ml容量瓶中，共用水约75ml，轻轻摇匀，在80℃水浴中浸提半小时，其间摇动几次，注意勿使样品粘附在瓶壁上。冷却，加入5%ZnSO₄及0．3N Ba(OH)₂各4ml，充分振荡，用水定容，用干滤纸过滤。

吸取滤液50ml放入150ml三角瓶中，逐滴加入6N HCl5ml，边加边摇转，在室温下放置一昼夜(或放入90℃水浴中不断摇动3min，再在水浴中放置7min，立即移入冷水中冷却至20℃)，加2－3滴甲基红指示剂，用饱和Na₂CO₃溶液中和之。将溶液通过小漏斗转入100ml容量瓶，加水定容。

吸取转化后的糖溶液10ml(含还原糖1－15mg)，放入150ml三角瓶中，加水10ml，摇匀。用移液管加入10ml0．05NK₃Fe(CN)₆，于沸水浴中加热20min，取出冷却，加入10mlZnSO₄－KI混合溶液和10ml 9%HOAc，放置5min，用0．05N Na₂S₂O₃标准溶液滴定到浅黄色时，加入1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点。

用20ml水同上操作，作K₃Fe(CN)₆溶液的空白标定。

(四)结果计算

先由空白标定和样品测定所用Na₂S₂O₃溶液的毫升数(V空和V样)和浓度(NNa₂S₂O₃)，计算所取用糖液中还原糖消耗的0．05N K₃Fe(CN)₆溶液的毫升数：

根据此值，从表27－2查得相当的还原糖(以葡萄糖计)的毫克数，由此计算样品中水溶性糖%：

表27－2 氰化盐—碘量法测定糖的表

〔0．05NK₃Fe(CN)₆的毫升数和与其相当的葡萄糖的毫克数〕