阿留申水貂病病毒
书籍:兽医微生物实验诊断手册
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《兽医微生物实验诊断手册》第607页(877字)
本病毒引起水貂持续性病毒感染,侵害肾、肝,使血液中浆细胞增多,丙种球蛋白异常增高,故又名浆细胞增多症病毒。病貂出现消瘦、衰弱、贫血和口渴等症状。
一、样品采集
可采取病貂血、尿、粪及脾、淋巴结等实质脏器。
二、病毒分离
一般应用细胞培养。仔猫肾继代细胞培养长成致密单层后接毒,然后置33℃下静止培养3~4天,此时细胞已开始变圆,部分脱落,7~9天细胞单层已成网状。也可应用貂睾丸细胞。
三、血清学试验
对流免疫电泳是常用的特异性诊断方法,检出率很高。具体方法如下。
1.将1~1.2%琼脂(用0.02mol/L,pH8.6巴比妥缓冲液配制)加热融化后,倒板,打二排孔,孔径2~2.5mm,孔距5mm。
2.将待检血清加于一排孔内,置电泳槽阳极,电压100V,电流8mA,电泳20min。
3.然后,于电泳槽阴极端的孔内加入抗原,继续电泳20min,电压80V,电流8mA。
4.电泳完毕,放湿盒内2h后判定。
所用抗原可用水貂肝、脾等脏器制取,也可用猫肾细胞传代毒制取。
四、碘凝集试验
剪掉貂的后脚小趾少许,用直径3mm的塑料管吸取血液,立即在灯上烤烧封闭管的无血端,血液凝固后直放在离心管内,以2500~3000r/min离心10min以分出血清。试验时,滴一小滴血清于玻板上,再加等量碘试液(碘化钾4g,碘片2g,蒸馏水30ml),混合后1min内判定结果,阳性样品出现明显片状或颗粒状沉淀物,阴性样品则呈透明棕色液。此法简单、快速,但检出率低,且属非特异性反应。
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