附件1 常用药剂和染色液的配法
出处:按学科分类—农业科学 中国农业出版社《农作物品种鉴定手册》第59页(3124字)
(1)常用药剂 无水酒精、95%酒精、冰醋酸、盐酸、甲醇、正丁醇、二甲苯、甘油、六六六、铁明矾、洋红、碱性复红、偏重亚硫酸钠、吉姆萨、柠檬酸钠、威尼斯松节油、加拿大树胶、秋水仙碱等。
(2)染色液配法
1)醋酸酒精液 取1份冰醋酸,3份无水酒精(或甲醇)配成。
2)盐酸酒精离析液 取浓盐酸1份和95%酒精1份配成。
3)醋酸洋红染液 取45%醋酸溶液100ml,加入洋红1-2g,煮沸约30秒,冷却后进行过滤,然后加入1%-2%铁明矾水溶液数滴,直到此液变为暗红色而不发生沉淀为止。
4)铁明矾媒染液 先用蒸馏水配制成4%的铁明矾水溶液,过滤后备用。因放置一定时间后发生混浊。故不宜大量配制备用,以新鲜配制为主。
5)苏木精染液 分别取苏木精0.5g,无水酒精或95%酒精10ml和蒸馏水90ml。
其具体配法是将苏木精放入酒精中溶解,再加入蒸馏水。此液须1-2个月成熟。瓶口盖以纱布数层或塞一棉塞,以保持通气。临用时过滤。并可直接应用,或者用蒸馏水稀释一倍后使用,可反复使用数次,但每次均需过滤。如不能预先配成,在配制时可加碘酸钠,使其氧化成熟。苏木精0.5g需加碘酸钠0.1g,溶后即可使用。
6)1N盐酸配法 取比重1.19盐酸82.5ml,加入蒸馏水定容至1000ml;或者用比重为1.16盐酸98.3ml,加入蒸馏水定容至1000ml。
7)锡夫氏溶液(亚硫酸复红液) 取碱性复红1g,放入200ml的煮沸蒸馏水中,用玻璃棒搅拌令充分溶解。冷至50℃时过滤,再加入20ml 1N HCl,冷却到20-25℃,然后加入偏重亚硫酸钠(或钾)(Na2S2O5)或无水亚硫酸氢钠(NaHSO3)1-2g,封闭瓶口,置于暗处12-24小时。该液体应成为淡黄色。如颜色过深,可加活性炭2g,振荡后过滤,滤液贮于暗处。
8)亚硫酸水溶液 由10%无水亚硫酸氢钠或偏重亚硫酸钠5ml、1N HCl 5ml和蒸馏水100ml配成。
9)吉姆萨染液
配法1:先将吉姆萨粉末1g溶于66mi纯甘油内,置于60℃恒温箱2小时,再加甲醇(中性,二级以上)66ml混合即可。配制的染液为浓染液或称贮藏液。
配法2:先将吉姆萨粉末3.8g放入375ml甲醇(中性,二级以上)内,待完全溶解后,加入纯甘油125ml,置于37℃恒温箱中48小时,并在保温期间动摇数次,经1-2周后过滤,即可使用。配制的染液为浓染液。
10)磷酸缓冲液(pH7-7.3) 甲液:用蒸馏水溶解磷酸二氢钾(KH2PO4)9.078g,然后加蒸馏水定容至1000ml。
乙液:用蒸馏水溶解磷酸氢二钠(Na2HPO4)9.465g,然后加蒸馏水定容至1000ml。
使用时,取甲和乙液,按一定比例配成不同的pH磷酸缓冲液。
例如配制pH6.98的磷酸缓冲液时,取甲液40ml和乙液60ml;又如配制pH7.2磷酸缓冲液时,取甲液28ml和乙液72ml。
若pH偏低,可加适量磷酸氢二钠水溶液调至所需的pH值;反之,如pH偏高,就可用磷酸二氢钾调节pH。
(3)酒精稀释表 配制各种不同浓度酒精应取95%酒精做原液,用蒸馏水加以稀释。下表列出简便配制方法:
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